إن تقنية مقايسة الامتصاص المناعي المرتبطة بالإنزيم - بالمقايسة المناعية المرتبطة بالإنزيم - أو اختبار ELISA هي اختبار مناعي يسمح باكتشاف أو فحص الجزيئات في عينة بيولوجية. تم وضع تصور له وتطويره من قبل اثنين من العلماء السويديين ، بيتر بيرلمان وإيفا إنجفال في جامعة ستوكهولم في عام 1971.

الجزيئات التي يتم فحصها بطريقة ELISA هي بشكل عام بروتينات. وتشمل أنواع العينات المواد البيولوجية السائلة - البلازما ، والمصل ، والبول ، والعرق - أو وسط زراعة الخلايا ، أو البروتين المؤتلف - البروتين الذي تنتجه خلية تم تغيير مادتها الوراثية عن طريق إعادة التركيب الجيني - منقى إلى محلول.

يستخدم اختبار ELISA بشكل أساسي في علم المناعة لاكتشاف و / أو قياس وجود البروتينات أو الأجسام المضادة أو المستضدات في العينة. يكتشف هذا الاختبار المصلي على وجه الخصوص الأجسام المضادة التي ينتجها الجسم استجابة للتلوث الفيروسي.

يمثل استخدام الأجسام المضادة لتشخيص الأمراض المعدية طريقة محددة وسريعة. تقنية ELISA هي تقنية إنزيمية مناعية تجعل من الممكن تصور ، من عينة بيولوجية ، التفاعلات بين مستضد - جسم يعتبره الكائن الحي غريبًا - والجسم المضاد باستخدام تفاعل لوني ناتج عن علامة إنزيمية - الفوسفاتيز القلوي والبيروكسيديز - مرتبطان سابقًا بالجسم المضاد. يؤكد تفاعل اللون تحديد البكتيريا المعزولة أو وجود الفيروس المطلوب ، وتعطي شدة اللون مؤشراً على كمية المستضدات أو الأجسام المضادة في العينة المعينة.

هناك أربعة أنواع رئيسية من اختبار ELISA:

• إليسا مباشر، يجعل من الممكن الكشف عن الأجسام المضادة أو قياسها. يستخدم فقط الجسم المضاد الأساسي ؛
• إليسا غير مباشر، وهو الأكثر استخدامًا ، يجعل من الممكن أيضًا اكتشاف أو فحص الأجسام المضادة. يستخدم جسمًا مضادًا ثانويًا يمنحه حساسية أفضل من ELISA المباشر ؛
• ELISA في المنافسةيسمح بجرعة المستضدات. ينتج عن طريق التنافس على السندات ، ولا يستخدم أي إنزيم ؛
• إليسا «في شطيرة»يسمح بجرعة المستضدات. تستخدم هذه التقنية بشكل شائع في البحث.

يستخدم اختبار ELISA في:

• البحث عن الأجسام المضادة وقياسها في علم الأمصال لتشخيص الأمراض المعدية: علم الفيروسات ، وعلم الطفيليات ، وعلم الجراثيم ، وما إلى ذلك ؛
• بروتينات الجرعات بتركيزات منخفضة: جرعات محددة من بروتينات معينة في البلازما (الغلوبولين المناعي E (IgE) ، الفيريتين ، هرمونات البروتين ، إلخ) ، واسمات الورم ، إلخ ؛
• جرعة الجزيئات الصغيرة: هرمونات الستيرويد ، هرمونات الغدة الدرقية ، الأدوية ...

يستخدم اختبار ELISA بشكل خاص لتشخيص العديد من الأمراض المعدية:

الأمراض المنقولة جنسيا

بما في ذلك التهاب الكبد والزهري والكلاميديا ​​وفيروس نقص المناعة البشرية. أوصت به السلطات الصحية ، وهو اختبار فحص الإيدز الرئيسي: فهو يظهر وجود الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية ومستضد p24 بعد ستة أسابيع من الإصابة.

الأمراض الإقليمية أو المتوطنة

الحمى الصفراء ، مرض فيروس ماربورغ (MVM) ، لادينج ، داء لايم ، شيكونغونيا ، حمى الوادي المتصدع ، الإيبولا ، حمى لاسا ، إلخ.

كوفيد -19

يتم إجراء اختبار ELISA بعد أكثر من 2 إلى 3 أسابيع من ظهور الأعراض ، مما يجعل من الممكن تحديد وجود الأجسام المضادة لـ SARS-CoV-2 في أقل من ساعة.

مسببات الأمراض الفيروسية التي تسبب التهابات ما قبل الولادة

داء المقوسات ، والحصبة الألمانية ، والفيروس المضخم للخلايا ، والهربس البسيط على سبيل المثال.

حالات اخرى

لكنه وجد أيضًا تطبيقات في الكشف:

• الحمل.
• أمراض المناعة الذاتية؛
• مسببات الحساسية الغذائية: التحديد الكمي لمجموع الغلوبولين المناعي E (IgE) يساعد في تقييم وعلاج الحساسية ؛
• الاضطرابات الهرمونية
• علامات الورم؛
• فيروسات النبات
• و أكثر من ذلك بكثير

كجزء من الكشف عن الأجسام المضادة المضادة لـ SARS-CoV-2 ، أكدت دراسة تجريبية أجريت في أغسطس 2020 من قبل معهد باستور و CNRS و Inserm وجامعة باريس موثوقية اختبار ELISA: تم اختبار كلا اختبار ELISA بروتين N بأكمله من SARS-CoV-2 (ELISA N) أو المجال خارج الخلية لارتفاع الفيروس (S) كمستضدات مستهدفة. ستتيح هذه التقنية التعرف على الأجسام المضادة في أكثر من 90٪ من الحالات ، بمعدل إيجابي كاذب منخفض جدًا يبلغ 1٪.

يتم إجراء اختبارات إليسا في مختبرات التحليل بوصفة طبية ، وتكلف حوالي 10 يورو ويتم تعويضها بنسبة 100٪ من التأمين الصحي.

يتم إجراؤها في مراكز المعلومات والفحص والتشخيص المجانية (CeGIDD) ، ويمكن أن تكون مجانية لفيروس نقص المناعة البشرية و SARS-CoV-2.